【摘 要】
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【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆生产建设兵团第五师91团,伊宁县动物卫生监督所
【基金项目】
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兵团国际合作项目（2013BC004）, 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室项目资助（2013KLS01）, 优质转基因肉羊新品种培育（2013ZX08008-003）, 国家自然基金项目（31360276）, 兵团博士资金项目（2009JC05）, 兵团青年科技创新基金（2013CB021）
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【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案：L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×10^6个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率。
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