【摘 要】
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目的 探讨丹皮酚对体外培养人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 CCK8法检测0.5,1,2,4,8 mmol/L丹皮酚作用24,48和72 h后A375细胞增殖水平.用0、1.25、2.5和5 mmol/L浓度丹皮酚作用24 h后,以Annexin-V/PI法观察A375细胞凋亡的变化、分别测定caspase 3,caspase 8和caspase 9的活性,并以Western
【机 构】
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210008南京市鼓楼医院皮肤科,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所
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目的 探讨丹皮酚对体外培养人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 CCK8法检测0.5,1,2,4,8 mmol/L丹皮酚作用24,48和72 h后A375细胞增殖水平.用0、1.25、2.5和5 mmol/L浓度丹皮酚作用24 h后,以Annexin-V/PI法观察A375细胞凋亡的变化、分别测定caspase 3,caspase 8和caspase 9的活性,并以Western印迹检测p53,NF-κB及相关蛋白水平的变化.结果 与空白对照组比较,0.5,1,2,4,8 mmol/L丹皮酚作用24,48和72 h后均对A375细胞的增殖有抑制作用,且与时间、浓度呈依赖性.1.25、2.5、5 mmol/L丹皮酚在作用24 h时,A375细胞早期凋亡率由对照组的(3.11±0.53)％分别上升至(13.74±1.73)％、(25.95±0.57)％、(46.44±0.81)％,各组与对照组间差异均有统计学意义(P＜0.05或＜0.01).2.5 mmol/L和5 mmol/L作用组的caspase 3,caspase 8,caspase 9活性升高,且与对照组间比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或＜0.01).p53及Bax的蛋白水平随药物浓度的增加而升高,NF-κB、bcl-2、bcl-XL的蛋白水平随药物浓度增加而降低.结论 丹皮酚对黑素瘤A375细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用.可通过细胞内和细胞外两条途径发挥促凋亡作用,其机制可能与调节p53及NF-κB基因有关。
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