【摘 要】
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目的将人的外源基因TH和GDNF共同转染SH-SY5Y细胞,建立一种可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用.方法将人GDNF和TH的cDNA构建于表达
【机 构】
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250012,北京大学神经科学研究所
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目的将人的外源基因TH和GDNF共同转染SH-SY5Y细胞,建立一种可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用.方法将人GDNF和TH的cDNA构建于表达载体PcDNA 3.0和PcDNA 3.1,形成重组真核表达载体PcDNA 3.1/h GDNF和PcDNA 3.0/h TH,同时转染至SH-SY5Y细胞系,利用RT-PCR鉴定筛选出高效稳定表达阳性克隆,将此工程细胞与大鼠原代多巴胺(DA)能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察DA能神经元的数目和生长状态.结果
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