选择性激光小梁成形术(SLT)可增加前房水排出,降低开角型青光眼患者的眼压,但其作用机制尚不清楚。小梁网房水排出阻力受到细胞外基质(ECM)影响,基质金属蛋白酶3(MMP-3)、MMP-9与小梁网ECM的降解密切相关。
目的利用永生化小梁细胞建立SLT激光效应模型,观察激光效应对小梁细胞表达MMP-3及MMP-9的影响。
方法将永生化人小梁细胞与色素颗粒混悬液共同隔夜培养16 h,用SLT所用的Q开关倍频532 nm Nd:YAG激光照射人小梁细胞,制备SLT激光效应细胞模型,激光能量为0.2 mJ,光斑直径为400 μm,脉冲持续时间为3 ns。分别于激光照射后1、4、8、12和24 h,采用实时荧光定量PCR法检测激光照射前后小梁细胞中MMP-3 mRNA及MMP-9 mRNA的相对表达情况;ELISA法检测激光照射前后不同时间点培养液中MMP-3及MMP-9蛋白质量浓度的变化。
结果SLT激光照射人小梁细胞前及照射后1、4、8、12和24 h后细胞中MMP-3 mRNA的相对表达量分别为1.00、1.32±0.12、2.08±0.05、2.34±0.04、2.77±0.05、2.49±0.27,各组间差异有统计学意义(F=15.966,P=0.007),其中激光照射后各时间点细胞中MMP-3 mRNA的相对表达量均明显高于对照组,至12 h表达量最高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。激光照射前后不同时间点细胞中MMP-9 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.91±0.10、1.27±0.07、1.46±0.07、1.69±0.09、0.87±0.09,各组间差异有统计学意义(F=30.526,P=0.005),其中激光照射后4、8和12 h小梁细胞中MMP-9 mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P=0.001、<0.001、<0.001)。激光作用后不同时间点小梁细胞培养液中MMP-3及MMP-9蛋白的质量浓度均明显高于相应时间点对照组的检测值,差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论SLT激光效应小梁细胞模型在激光作用后早期对MMP-3及MMP-9基因的表达和分泌均明显增加,但其表达随着激光照射后时间的延长而减弱。