【摘 要】
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以含有苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的苹果枝条为试材,设计扩增产物片段为176bp的特异性引物,优化反应条件,构建标准曲线,建立了苹果茎沟病毒的SYBR Green
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,中国农业科学院植物保护研究所
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以含有苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的苹果枝条为试材,设计扩增产物片段为176bp的特异性引物,优化反应条件,构建标准曲线,建立了苹果茎沟病毒的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测方法。对该方法进行了灵敏度和重复性试验,并且利用建立的方法对受ASGV感染的苹果枝条和树叶进行定量检测。最后,比较了实时荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR检测的灵敏度。结果表明:样品的荧光定量PCR有良好的扩增曲线和溶解曲线,该方法的灵敏度可达6.8×102拷贝/μL,检测其灵敏度是传统RT-PCR的100倍,所建立的荧光定量技术可用于田间样品中此病毒的检测,丰富了ASGV的检测手段,提高了检测灵敏度,具有较好的应用前景。
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