朊蛋白106-126肽段在Prion病细胞模型中的作用机制研究

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目的 研究朊蛋白106-126肽段在细胞水平上的毒性作用机制.方法 PC12细胞常规培养后加入神经生长因子(NGF)诱导成神经元样细胞,再加入朊蛋白106-126肽段,检测细胞存活率,观察细胞生长和形态变化,检测细胞氧化应激现象和能量代谢的改变,检测细胞凋亡现象及其相关机制.结果 细胞接触肽段后存活率由(98.1±1.9)%下降到(69.2±4.7)%,流式细胞仪检测细胞出现亚二倍体峰.氧化应激现象于接触肽段12 h后出现并且持续存在,细胞内钙离子浓度从(185.74±12.93)nmol:L增加到(493.00±58.71)nmol/L,线粒体膜电位下降至65%,Ca2+ATP酶活性从54.92±4.05降低至34.92±4.86,细胞能量代谢水平下降,最终出现细胞凋亡,Bcl-2/Bax系统稳态变化参与了诱导凋亡的过程.结论 利用106-126肽段感染分化的PC12细胞可能是在细胞水平上研究朊蛋白毒性作用的理想模型.PrP106-126的毒性作用是通过持续的氧化应激、干扰细胞的能量代谢、钙超载、最终诱导宿主细胞的凋亡来实现的,并且氧化应激可能处于始动与核心的地位。

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