【摘 要】
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目的利用报告基因法建立抗人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2， HER2）单抗的抗体依赖性细胞吞噬作用（antibody-dependent cell-mediated phagocytosis， ADCP）生物学活性检测方法。方法以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞，SKBR3细胞系为靶细胞
【机 构】
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中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项项目资助（No.2018ZX09736-016-007）； 中山市重大科技专项项目资助（编号210204163866513）；
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目的利用报告基因法建立抗人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2， HER2）单抗的抗体依赖性细胞吞噬作用（antibody-dependent cell-mediated phagocytosis， ADCP）生物学活性检测方法。方法以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞，SKBR3细胞系为靶细胞，通过荧光素酶检测系统建立抗HER2单抗的ADCP测活方法，并运用实验设计（design of experiment，DOE）方法进行试验优化和方法学验证。结果该方法量效关系符合四参数方程：y=（A-D）/[1+（x/C）B]+D，方法优化确定量效范围为400～3.959 ng·mL-1，靶细胞接种密度为每孔1.5×104个，效靶比为5∶1，诱导时间为7h。该方法具有良好的专属性；不同稀释组样本百分相对效价分别为（55.04±1.35）%、（78.10±6.33）%、（102.69±5.21）%、（133.32±2.58）%和（152.87±8.11）%；回收率在101%～110%，RSD均小于10%。结论本研究成功建立了专属性、重复性，准确性均较好的适用于评价抗HER2单抗ADCP生物学活性的方法。
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