双酚A对小鼠睾丸间质细胞毒性及miR-203-3p表达的影响

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[背景]双酚A(BPA)作为一种重要的增塑剂原料被广泛应用,其对机体健康产生的损伤作用越来越被人们所重视;而生殖毒性是损伤作用中的重要一方面,研究BPA所导致的生殖损伤及其机制已成时下热点。微小RNA(miRNA)的生物学作用及早期损伤标志的意义也被人们所重视。[目的]研究BPA对小鼠睾丸间质细胞毒性及miR-203-3p表达的影响。[方法 ]通过不同浓度的BPA(0、1、10、100、1 000μmol/L)处理小鼠睾丸间质细胞(TM3)24 h后,运用CCK-8法检测细胞活力情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡指标;应用realtime PCR对miR-203-3p的表达水平进行检测。然后通过TargetScan数据库及miRDB数据库对miR-203-3p的靶基因进行预测,并通过DAVID数据库对靶基因情况进行GO分析及Pathway分析。[结果 ]随着染毒浓度增加,各组的TM3细胞活力出现不同程度的下降趋势,但仅1 000μmol/L浓度组与对照组差异具有统计学意义(P <0.05);与对照组相比,1 000μmol/L组的细胞总凋亡率[(31.33±7.12)%]升高(P <0.05);miRNA的检测结果显示,与对照组相比,mi R-203-3p在1、100μmol/L两个浓度组出现升高(均P <0.05);而当浓度为1 000μmol/L时,该miRNA表达水平出现了下降(P <0.05)。通过两个数据库生物信息学预测的其可能调控靶基因为278个;通过David数据库进行GO分析的富集结果显示,排在第一位的生物过程、分子功能和细胞组分分别是转录DNA模板、蛋白结合和核;Pathway分析富集的信号通路排在首位的是FoxO信号通路。[结论 ]不同浓度的BPA可以导致小鼠睾丸间质细胞出现不同程度的损伤现象,这种损伤现象可能与miR-203-3p的改变有关,且该miRNA可能成为重要的早期损伤检测指标。
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