【摘 要】
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目的 :分析并验证调控E74样因子3(E74-like factor 3,Elf3)表达的微RNA(microRNA,miRNA),并探索该miRNA对结直肠癌细胞功能的影响。方法 :运用数据库miRGen Targets、miRNA V
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院消化科,上海市消化疾病研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81201911);2012年上海高校青年教师培养资助计划(编号:沪教委人[2012]46号);上海市科学技术委员会科研计划项目(编号:12ZR1446200)
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目的 :分析并验证调控E74样因子3(E74-like factor 3,Elf3)表达的微RNA(microRNA,miRNA),并探索该miRNA对结直肠癌细胞功能的影响。方法 :运用数据库miRGen Targets、miRNA Viewer及MicroCosm Targets分析调控Elf3表达的miRNA。根据miRNA序列设计miRNA模拟物及抑制因子,应用miRNA转染技术改变结直肠癌SW1116细胞中该miRNA表达水平后,采用实时荧光定量-PCR法和蛋白质印迹法检测Elf3表达水平的变化。同时,提取30例结直肠癌组织及对应癌旁正常黏膜组织的RNA,反转录并实时荧光定量-PCR检测该miRNA和Elf3的表达水平。FCM和MTT法分别检测该miRNA模拟物转染对结直肠癌SW1116细胞周期、凋亡和增殖能力的影响。结果 :数据库分析显示,微RNA-198(microRNA-198,miR-198)可调控Elf3表达。应用其模拟物转染可显著提高结直肠癌SW1116细胞中miR-198水平(P<0.01),并下调Elf3表达(P<0.01);相反,miR-198抑制因子转染可显著降低miR-198的水平(P<0.01),并上调Elf3的表达(P<0.01)。同时,与癌旁正常黏膜组织相比,结直肠癌组织中miR-198表达水平降低(P<0.01),且与Elf3表达呈负相关(P<0.001,r2=0.697 3)。miR-198模拟物转染可抑制结直肠癌细胞增殖(P<0.01),但对细胞周期和凋亡没有明显影响(P>0.05)。结论 :miR-198在结直肠癌中可调控Elf3的表达,并抑制结直肠癌细胞增殖。
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