慢病毒介导稳定表达抑制PRRSV复制的shRNA细胞系的建立

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fgfg56

【摘要】

：

利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞,建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆,并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的

【作者】

：

吴锦艳田宏尚佑军陈妍王光祥刘湘涛张志

【机构】

：

中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2016年11期

【关键词】

：

PRRSV shRNA Marc-145细胞系慢病毒表达技术

【基金项目】

：

农业行业标准制定计划项目(2014-308)

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利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞,建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆,并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术,将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组,获得表达骨架,重组后的表达载体在转染试剂介导下与已经优化的辅助质粒Vira PowerTM Packaging Mix共转染293-FT包装细

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