【摘 要】
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目的:从海马组织提取中国人神经生长因子基因(NGF β),分析中国人NGF β序列,再克隆成熟肽部分,使NGF β在大肠杆菌中表达.方法: 提取组织总RNA进行逆转录,克隆到PCRⅡ载体,
【机 构】
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宁波市第二医院肿瘤分子生物学实验室
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目的:从海马组织提取中国人神经生长因子基因(NGF β),分析中国人NGF β序列,再克隆成熟肽部分,使NGF β在大肠杆菌中表达.方法: 提取组织总RNA进行逆转录,克隆到PCRⅡ载体,得650 bp DNA片段,以PCRⅡ/NGF β载体为模板,扩增C端成熟肽部分,并克隆到PG5中,转化大肠杆菌BL21用异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导培养.表达产物提纯、复性后,进行活性测定. 结果:NGF β cDNA全序列为1 047 bp,所克隆的蛋白编码部分为636 bp,由212个氨基酸组成,序列分
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