稳定沉默NF kappa B p65 HT 29细胞系建立及其裸鼠种植瘤药物敏感性的检测

来源 :肿瘤预防与治疗 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wjc_0758
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目的:利用逆转录病毒介导的shRNA稳定沉默NF kappa B p65基因,观察沉默NF kappa B p65对HT29细胞药物敏感性的影响。方法:设计并合成针对p65基因的shRNA序列,构建逆转录病毒质粒;脂质体转染逆转录病毒质粒至结肠癌细胞株HT29;G418筛选阳性细胞,局部消化法挑选单克隆;Western blot检测蛋白表达水平;于裸鼠皮下接种细胞形成种植瘤。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示,构建成功的逆转录病毒载体被HindⅢ限制性内切酶切为两个分别长1950bp与5800bp片段。测序结果
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