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为探讨人睾丸精子结合蛋白（TSBP）在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用，检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B／tsbp。稳定转染HEK293细胞后，蛋白免疫印迹检测到培养细胞中融合蛋白的表达。选择表达量高的细胞克隆，扩增并用金属亲和层析柱（IMAC）从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6-TSBP。用放射自显影法检测HEK293细胞中蛋白激酶A（PKA）活性，发现重组质粒转染组PKA活性高于对照组．确定了TSBP对PKA活性