目的 采用组织特异性启动子SM22α,构建靶向大鼠磷脂酰肌醇3激酶β亚单位(Pik3cb)的短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,观察其对静脉移植血管血栓形成和新生内膜增生的影响.方法 建立大鼠颈静脉-动脉移植模型,通过Pluronic F-127质粒缓释系统在血管吻合完成后局部喷涂凝胶进行RNA干扰.实验分4组,每组30只SD大鼠,A组:对照组,空白Pluronic F-127凝胶；B组:SM22α组,含特异性SM22α启动子质粒的凝胶；C组:巨细胞病毒(CMV)组,含非特异性CMV启动子质粒的凝胶；D组:Wortmannin阳性对照组.分别于术后1、3、7、14、28 d截取移植血管,苏木素-伊红(HE)染色观察新生内膜厚度;免疫组织化学检测磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR,Ser2448),原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞捌亡.另设一平行实验组(12只SD大鼠),按上述方法分为4组,于术后3d取材,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-PCR)测定Pik3cb mRNA的相对表达量.结果 大体观察移植血管通畅率B组最高(86.7％),与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)；Pik3cb mRNA相对表达量B、C、D组分别下降了73.3％、81.2％、68.4％,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)；术后1、3、7、14、28 d,B组与A组比较,磷酸化mTOR(Ser2448)阳性面积均显著降低,细胞凋亡阳性面积均显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05),术后7、14、28 d,B组与A组比较,血管内膜厚度显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 SM22α特异性启动子/增强子真核表达载体可通过下调血管平滑肌细胞磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-mTOR(PI3 K-Akt-mTOR)信号通路而抑制其向内膜增殖、迁移,促进其凋亡,防止血管新生内膜增生,提高移植血管通畅率。
SM22α启动子/增强子基因调控磷酸肌醇3激酶信号通路对移植血管新生内膜增生的影响
【摘 要】
：
目的 采用组织特异性启动子SM22α,构建靶向大鼠磷脂酰肌醇3激酶β亚单位(Pik3cb)的短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,观察其对静脉移植血管血栓形成和新生内膜增生的影响.方法 建立大鼠颈静脉-动脉移植模型,通过Pluronic F-127质粒缓释系统在血管吻合完成后局部喷涂凝胶进行RNA干扰.实验分4组,每组30只SD大鼠,A组:对照组,空白Pluronic F-127凝胶；B组:SM
【机 构】
：
030024太原,山西省心血管病医院(研究所)心血管外科,030024太原,山西省心血管病医院(研究所)心血管外科,030024太原,山西省心血管病医院(研究所)心血管外科,030024太原,山西省心
【出 处】
：
中华实验外科杂志
【发表日期】
：
2013年30期
论文部分内容阅读
其他文献
目的 观察骨化三醇对原发性骨性关节炎的治疗效果.方法 收集2011年10月至2012年10月在海口市人民医院骨化三醇治疗的膝关节骨性关节炎的患者30例,测定并分析血1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)与24 h的尿钙、磷水平.对治疗前与治疗后的数据采用单因素方差分析及相关性检测评估其疗效.结果 1年内30例患者按时回院检查,随访率为100％.与治疗前比较,治疗半月至1年病患的膝关
本研究旨在建立Pygo2人肾癌OS-RC-2细胞在裸鼠皮下移植和转移瘤模型,观察OS-RC-2肾癌移植瘤增殖和相关生物特性.一、材料与方法1.材料:BALB/c-nu/nu裸小鼠16只(雌性),3周龄,体质量(14.0±0.5)g.OS-RC-2细胞源自日本1例肾透明细胞癌的男性患者.2.噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线:保证活细胞率＞99％.对细胞经行处理.将裸鼠分4组,分别为A组:Pygo2
期刊
目的 观察低浓度血清条件下不同浓度的血小板衍生因子BB(PDGFBB)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在人肌腱细胞体外培养中对人肌腱细胞的增殖和胶原形成的影响.方法 在含0％和1％胎牛血清(FBS)的c-MEM培养基中,加入PDGFBB(5、10、50 μg/L),bFGF(5、10、50 μg/L)进行人肌腱细胞培养,10％ FBS的培养组作为对照组.使用拉马拉蓝测定细胞增殖速度及天狼猩红染
目的 探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)上皮间质转化(EMT)与核转录因子叉头框蛋白Q1(FOXQ1)的相关性,以及FOXQ1与膀胱癌临床病理特征之间的关系.方法 选用膀胱移行细胞癌手术切除标本65例,每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其远端正常黏膜组织对照.采用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测各例标本中转化生长因子(TGF)-β1、核转录因子FO
血管化是组织工程中研究的重点和难点[1].骨形态发生蛋白-2(BMP-2)是目前刺激骨组织修复最强的生长因子.我们课题组以往在研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)诱导成骨作用的过程中发现rhBMP-2在促进成骨的同时也通过上调血管内皮生长因子(VEGF)的表达促进了血管生成,由于同时具有成骨、成血管这种特性,因此BMP-2具有很好的骨修复效果[2],国内外的一些学者也得到了与我们相似的结论[
期刊
已有发现,携带神经毒素(N-异丙基丙烯酰胺单体)的磁性纳米颗粒可被靶向输送到心房自主神经节并在局部释放其携带的神经毒素以起到去自主神经支配的作用[1].本研究旨在制备携带神经毒素的磁性纳米复合微球及其在鞘内的荧光成像效应.一、材料和方法1.材料:傅立叶变换红外光谱仪(FTIR,VERTEX 70,布鲁克,埃特林根,德国);Nicolet 5-DXB傅立叶变换红外光谱仪(赛默飞世尔科技,波士顿,美国
期刊
目的 观察热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)小干扰RNA(siRNA)对人脑胶质瘤细胞周期及增殖的影响.方法 运用Control siRNA、CHIP siRNA分别转染原代培养人脑胶质瘤细胞,Western blot检测CHIP蛋白表达,流式细胞仪检测CHIP siRNA对原代培养人脑胶质瘤细胞周期的影响,细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验检测CHIP siRNA对原代培养人脑
目的 观察多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIGl)基因过表达对人肝癌细胞株Hep-G2恶性表型的影响并探讨其作用机制.方法 LRIG1基因重组过表达载体(pEGFP-N1-LRIG1)转染Hep-G2细胞,分别于转染后24、48、72 h用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测其对Hep-G2细胞增殖的作用；Transwell侵袭实验检测其对细胞侵袭能力的影响；应用实时定量聚合酶链反应(Real
目的 探讨银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将80只清洁级雄性SD大鼠随机分为两组:对照组(A组:给予生理盐水治疗,n=40),银杏叶提取物干预组(B组:给予等量的银杏叶提取物,n=40),每组再分为4个亚组,即再灌注后1、3、6、24 h组,每个亚组10只.制作大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型.应用苏木素-伊红(HE)染色法观察脑组织形态学变化及免疫组织化学链霉亲
深低温停循环术后肺部并发症发生率高达20％[1].其机制目前认为主要包括肺缺血再灌注损伤及炎性反应2个方面[2].我们应用核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)观察NF-κB介导的炎性反应在大鼠深低温缺血再灌注所致急性肺损伤中的作用.一、材料与方法28只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、深低温缺血再灌注损伤组(I/R组)、PDTC干预组1和PDTC干预组2
期刊