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探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对人B7-H6基因的激活作用。
方法提取人基因组DNA作为模版，聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)获取约2.2 Kb B7-H6基因启动子DNA片段，扩增产物经KpnI和HindⅢ双酶切后插入到pGL3-Basic中构建双荧光素酶报告基因pGL3-B7-H6，测序正确后分别与HBV病毒蛋白S、C和X的真核表达质粒pCMV-HBs、pCMV-HBc和pCMV-HBx共转染HepG2细胞，检测荧光素酶活性变化，然后用不同剂量的pCMV-HBx表达质粒与pGL3-B7-H6共转染HepG2细胞，Western blot检测B7-H6蛋白表达水平。
结果本研究克隆出的B7-H6基因启动子片段序列与GenBank中记录一致，pGL3-B7-H6构建成功。pGL3-B7-H6启动子质粒转染HepG2细胞荧光素酶活性较转染空载体pGL3-Basic组显著增加(5.24±1.25 vs. 1.12±0.31，P＝0.005)。pGL3-B7-H6启动子质粒与pCMV-HBx质粒共转染HepG2细胞，荧光素酶活性较对照组显著增加(17.60±3.36 vs. 6.73±1.36，P＝0.001)。Western blot结果显示，HBx蛋白可显著增强B7-H6蛋白的表达。
结论本研究发现HBx蛋白可能增强B7-H6基因启动子的转录活性并促进B7-H6蛋白的表达。