锌指蛋白KOX12单克隆抗体的制备及在肿瘤组织中的表达

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目的:制备重组锌指蛋白KOX12(肿瘤相关蛋白),并制备其特异性的单克隆抗体,用免疫组化观察它在肿瘤组织中的表达。方法:通过逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)得到KOX12 cDNA片段,构建真核表达质粒和原核表达质粒,在大肠杆菌M15和293T细胞中进行表达。以KOX12蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,用聚乙二醇(PEG)融合法进行细胞融合制备产生抗KOX12单克隆抗体的杂交瘤细胞株;该抗体用免疫组化法对结肠癌、肺癌组织进行染色。结果:构建了含KOX12的真核细胞和原核细胞的表达质粒,并表达及纯化了
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