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建立了固相萃取-高效液相色谱／串联质谱（SPE—HPLC—MS／MS）测定大鼠血浆中二十二碳六烯酸（DHA）的分析方法。血浆样品经C18固相萃取（SPE）小柱净化后，采用ThermoC18色谱柱分离，以0．2％甲酸水溶液和乙腈为流动相，等度洗脱，在电喷雾离子源负离子模式下，采用质谱选择反应监测（SRM）模式检测，外标法定量。结果表明：DHA在0．10～60．0μg／mL范围内具有良好的线性关系（r2=0．9990）；检出限（S／N=3）为0．04μg／mL，定量限（S／N=10）为0．10μg／mL；在2