【摘 要】
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目的探讨RGD-GGG-K18多肽与融合双表达质粒p IRES2-3×E7-HSP110-EGFP自组装纳米颗粒的抗肿瘤效果。方法化学合成带有正电荷的RGD-GGG-K18多肽,以富含正电荷的RGD-GGG-K18多
【机 构】
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蚌埠医学院附属解放军第105医院皮肤科;
【基金项目】
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安徽省自然科学基金(1408085MH149);南京军区医学科技创新课题(ZX10);国家自然科学基金(81502728)
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目的探讨RGD-GGG-K18多肽与融合双表达质粒p IRES2-3×E7-HSP110-EGFP自组装纳米颗粒的抗肿瘤效果。方法化学合成带有正电荷的RGD-GGG-K18多肽,以富含正电荷的RGD-GGG-K18多肽与质粒p IRES2-3×E7-HSP110-EGFP通过静电引力作用自我组装形成纳米颗粒。凝胶阻滞实验、透射电镜、DNase I保护实验和Western blot等方法对纳米颗粒进行鉴定。通过流式细胞术、体外特异性细胞毒释放实验分析疫苗诱导的免疫应答和其介导的CTL毒性效应。以TC-1细胞构建预防性及治疗性肿瘤模型,观察纳米颗粒疫苗在动物体内的抗肿瘤效应。结果成功构建了RGD-GGG-K18/p IRES2-3×E7-HSP110-EGFP纳米颗粒疫苗,确定最佳多肽/DNA电荷比r=2.0;当r=2.0时所制备的颗粒,大小均一,类圆形,绝大部分直径分布于50 nm左右。该纳米颗粒可将h HSP110基因导入肿瘤细胞,并在体外和体内均很大程度上提高了抗原表位特异性的免疫原性,诱导T淋巴细胞增殖,显著增强抗原特异性CTL应答及其产生的细胞毒效应。该纳米颗粒疫苗显著抑制了小鼠的肿瘤生长,延长其存活时间。结论 RGD-GGG-K18/p IRES2-3×E7-HSP110-EGFP纳米颗粒疫能有效抑制宫颈癌的发生和发展。
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