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目的
研究HER-2和TOP2A对乳腺癌细胞系SK-Br-3的放射敏感性影响，并探讨二者联合作用，为临床研究奠定基础。
方法分别构建表达HER-2或TOP2A siRNA的重组质粒，并使用lipofectamine 2000将其转染至乳腺癌细胞SK-Br-3中，敲降HER-2和TOP2A的基因表达。2 d后利用蛋白印迹法检测干扰效果，利用流式细胞仪和MTT法分别检测放射处理后细胞凋亡和增殖变化，并检测凋亡和增殖相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Ki-67表达变化。克隆形成实验检测放射敏感性。
结果在乳腺癌细胞SK-Br-3中敲降HER-2和TOP2A的表达，放射处理后细胞凋亡率升高，增殖率降低。凋亡标志蛋白活化的Caspase-3表达升高，凋亡抑制蛋白Bcl-2表达降低。细胞增殖标志蛋白Ki-67表达降低。同时敲降HER-2和TOP2A两个基因时促进凋亡和抑制增殖及克隆形成的作用增强，表明这两个基因存在协同效应。
结论敲降HER-2和TOP2A基因在乳腺癌细胞SK-Br-3中的表达后，乳腺癌细胞的放射敏感性提高，细胞凋亡率升高，细胞增殖率降低，克隆形成率降低，且2基因存在协同效应，作用机制可能与Caspase-3、Bcl-2有关的凋亡通路及细胞增殖蛋白Ki-67有关。