【摘 要】
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目的 探讨紫檀芪(Pterostilbene,PTE)对TGF-β1诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤的保护作用及与Nrf2/ARE信号通路的关系.方法 通过转化生长因子(TGF-β1)诱导MRC-5细胞建立肺纤维
【机 构】
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武汉大学中南医院,湖北武汉430071
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目的 探讨紫檀芪(Pterostilbene,PTE)对TGF-β1诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤的保护作用及与Nrf2/ARE信号通路的关系.方法 通过转化生长因子(TGF-β1)诱导MRC-5细胞建立肺纤维化模型,运用CCK-8法检测增殖抑制率,DCFH-DA检测细胞活性氧(ROS)水平,生化试剂盒检测HYP、MDA、GSH-Px、SOD水平,Westem blot检测细胞Nrf2、HO-1及NQO1、Keap1的表达量,采用胞质胞核分离以及免疫荧光法标记Nrf2细胞内的分布情况.结果 10ng/ml TGF-β1作用48h可成功诱导MRC-5细胞发生氧化应激和纤维化,且细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)表达水平均显著升高(P＜0.01);筛选出紫檀芪20、40、80μmol/L干预MRC-5细胞48h为最佳药物浓度和模型时间;免疫荧光法可见紫檀芪可以促进细胞浆中的Nrf2发生核转移;与模型组相比,紫檀芪能降低ROS水平和MDA、HYP含量,同时提高SOD、GSH-Px活性,显著上调抗氧化酶Nrf2、HO-1、NQO1、Keap1的蛋白表达水平(P＜0.05或P＜0.01).结论 紫檀芪对TGF-β1诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能通过促进MRC-5细胞中的Nrf2发生核转移,激活Nrf2/ARE信号通路,从而调控相关的氧化应激因子等的表达水平.
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