探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)过表达改善肺部胶原合成的机制。
方法体外分离培养ACE2基因过表达(ACE2＋/＋)小鼠及野生型(WT)小鼠的肺成纤维细胞，设置WT－对照组、WT－血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、ACE2＋/＋－对照组、ACE2＋/＋－AngⅡ组、ACE2＋/＋－AngⅡ＋A779组。Western印迹法检测各组ACE2、Ⅰ型胶原、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体蛋白3(NLRP3)、自噬蛋白Beclin1、泛素结合蛋白P62、微管相关蛋白轻链3－Ⅱ(LC3－Ⅱ)蛋白相对表达量，并对三磷酸腺苷(ATP)含量进行检测。对ACE2＋/＋细胞进行自噬抑制剂干预，设置ACE2＋/＋－对照组，ACE2＋/＋－AngⅡ组，ACE2＋/＋－AngⅡ＋3－甲基腺嘌呤(3－MA)组，ACE2＋/＋－3－MA组。Western印迹法检测Ⅰ型胶原、P62、LC3－Ⅱ蛋白相对表达量。体内实验将WT和ACE2＋/＋小鼠随机分为四组：WT－对照组、WT－博来霉素(BLM)组、ACE2＋/＋－对照组、ACE2＋/＋－BLM组。BLM组的处理方法为BLM(3.5 mg/kg)气管内滴注，对照组为相同体积生理盐水气管内滴注，28 d后处死，取肺组织进行HE、Masson染色以及NOX4、P62和LC3的免疫组化评价。
结果体外分离的肺成纤维细胞的波形蛋白免疫组化和免疫荧光为阳性。ACE2＋/＋－对照组的ACE2蛋白相对表达量显著高于WT－对照组(0.202±0.062比0.067±0.040，P<0.05)。WT－AngⅡ组的Ⅰ型胶原、NOX4和NLRP3蛋白相对表达量均显著高于WT－对照组(0.861±0.129比0.417±0.076、0.432±0.036比0.318±0.058、0.367±0.125比0.045±0.012，均P<0.05)。ACE2＋/＋－AngⅡ组的Ⅰ型胶原和NLRP3蛋白相对表达量与ACE2＋/＋－对照组差异均无统计学意义(均P>0.05)，ACE2＋/＋－AngⅡ＋A779组的Ⅰ型胶原和NOX4蛋白相对表达量均显著高于ACE2＋/＋－AngⅡ组(0.707±0.155比0.458±0.108、0.299±0.038比0.149±0.090，均P<0.05)。ACE2＋/＋－对照组自噬蛋白Beclin1、P62和LC3－Ⅱ的蛋白相对表达量显著高于WT－对照组(0.834±0.051比0.274±0.018、0.467±0.078比0.093±0.025、0.494±0.065比0.150±0.054，均P<0.05)，ACE2＋/＋－AngⅡ＋A779组均显著低于ACE2＋/＋－AngⅡ组(1.331±0.203比1.565±0.069、0.298±0.096比0.438±0.077、0.464±0.093比0.768±0.071，均P<0.05)。ACE2＋/＋－AngⅡ＋3－MA组的Ⅰ型胶原蛋白相对表达量显著高于ACE2＋/＋－AngⅡ组(0.383±0.125比0.032±0.013，P<0.05)，ACE2＋/＋－AngⅡ＋3－MA组的LC3－Ⅱ蛋白相对表达量显著低于ACE2＋/＋－AngⅡ组(1.177±0.140比1.387±0.183，P<0.05)。在BLM诱导的肺纤维化动物模型中，ACE2＋/＋－BLM组小鼠肺纤维化程度和NOX4蛋白相对表达量显著低于WT－BLM组，但LC3蛋白相对表达量显著高于WT－BLM组。
结论ACE2过表达通过诱导自噬改善肺部胶原生成。