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【摘 要】 目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与纤维蛋白胶（FS）治疗半月板损伤的研究。 方法：选用健康成年兔48只，将之分成空白对照组、FS/FGF治疗组，在兔半月板上造成统一的无血运区损伤。各自将FS或者FGF/FS注射进伤口，直到填充物和半月板相持平，FGF组实验兔每日于膝关节处注射1mlFGF2.0μg/ml一次，连续三周，空白对照组不使用填塞物对伤口进行处理，所有实验动物均在术后的第2、6和12周被处死，每组每次4只兔子，一共8个半月板，对所得半月板标本的大体形态进行观察，并通过组织学检查对之进行分析，之后将之放入10%的甲醛溶液中进行3天左右的固定，在通过HE染色后置于光镜下进行仔细观察。结果：对三组所有兔子膝关节的切口以及关节内情况进行详细探查，并观察半月板和关节面是否存在有黏连；空白对照组所有兔子的半月板创伤均未能完全愈合，其内无组织填充；FS组与FGF/FS组所有兔子的半月板创伤均获得愈合，且其内已填满组织。愈合部位新生组织颜色较半月板更深，创伤裂口与术前相比变窄，表面略微内凹，新生组织和半月板组织紧密黏连。结论：FGF是一种理想的生物性载体，与FS复合物治疗半月板无血运区损伤有很好的治疗效果。
【关键词】 纤维蛋白胶 半月板 损伤
一、材料与方法
1材料与方法
1.1试验材料
1.2 试验方法
1.2.1 FG的配制与FGF/FG的配制
FG的配制：对FS及凝血酶各使用1ml盐水进行溶解，而后再依次用注射器进行抽取。在进行注射时只需将两支注射器一同注入患处即可。
FGF/FG符合物的配制：分别用2 ml等渗盐水溶解bFGF 20 μg，然后用溶液分别溶解凝血酶及纤维蛋白原，使bFGF浓度为10μg/ml，再分别吸入2副注射器备用[3]。
选择成年青紫兰兔48只，体重2.0～3.0 kg。将之分为空白对照组、FS对照组和FGF/FS治疗组。以质量浓度为25 g/L的戊巴比妥钠静脉注射麻醉（25 mg/kg）。在兔子两侧膝关节的髌韧带内部各作一切口，并从此处向上将兔皮肤切开，使用半月板拉钩将操作部位的结构全部暴露出来，通过刀片在内侧的半月板前角和中央制造出一裂伤，再分别将试验药物注入其中，空白对照组在创伤制造后不做任何操作即行缝合，不予任何治疗。
2 结果
空白对照组所有兔子的半月板创伤均未能完全愈合，其内无组织填充；FS组与FGF/FS组所有兔子的半月板创伤均完全愈合，且其内已被组织填充。愈合部位新生组织颜色较半月板更深，创伤裂口与术前相比变窄，表面略微内凹，新生组织和半月板组织紧密黏连。
FS组：兔子在手术后第2周时，半月板于镜下可见损伤部位已填充有纤维蛋白，由于脱水的原因，这些组织大都较为疏松，其中偶见有少部分成纤维细胞样细胞；手术后的第6周时，半月板于镜下可见损伤部位所覆盖组织类似于纤维组织，通过偏振光显微镜可见细胞周边存在疏松的编织状胶原纤维，基质附近有少量成纤维细胞样细胞；手术后的第12周时，半月板于镜下可见损伤部位已完全被胶原纤维样组织所填充，有大量的成纤维细胞样细胞与周边组织密切连接；FGF/FS组：兔子在手术后第2周时，半月板镜下可见损伤处已填充有红色纤维组织，且存在有少量的成纤维细胞样细胞；手术后第6周时，半月板镜下可见损伤部位填充有胶原纤维，且存在有大量的成纤维细胞，部分区域偶见有纤维软骨样组织；手术后第12周时，半月板镜下可见损伤部位填充有纤维软骨样组织。细胞为椭圆或圆形，可观察到软骨囊等软骨细胞独有的组织，但愈合部位组织与周边半月板依旧存在差异，其内存在成纤维细胞样细胞。
3 讨论
半月板在膝关节的组成中十分重要，其组成成分绝大部分为非胶原蛋白，同时还存在有糖蛋白、氨基葡聚糖等，所含胶原蛋白中90%均为I型胶原蛋白。胶原纤维紧密排列，互相交错，组成了胶原束，而半月板就处在由胶原束形成的网状结构之中，其外1/3由紧密平行排列的胶原束所组成，内2/3的胶原束则相对较为分散，其内没有血管进行血液供应，蛋白多糖-胶原的比例较高[1]。
半月板的修复同其他组织一样，需要大量的细胞因子的参与，发生在有血供应的半月板区的损伤修复过程同其他损伤修复一样需经历出血、凝血、炎症反应、血肿机化、局部组织增生黏连及后期的改建。而半月板无血液供应区发生损伤后，却由于局部没有出血，不能象其他有血供应组织那样进行正常的自我修复[2]。许多研究已经证实，局部的出血和炎症反应能够为组织修复提供更多重要的细胞因子，如表皮生长因子、转化生长因子等。这些细胞因子刺激局部新生血管的形成和组织的增生，从而启动组织的损伤修复过程。许多试验研究表明碱性成纤维细胞生长因子，参与了半月板组织损伤的修复，能够促进培养的半月板细胞增殖和基质合成[3]。
相关研究曾单独使用FGF对半月板受损的情况进行了治疗，研究结果表明患处部位非血供区内的半月板基本没有发生愈合，这可能与创伤内没有支架材料、FGF没有合适载体等问题有关[4]。此外，研究结果还证明了FGF与FTA混合使用的效果要明显优于其中任一物质单用的效果，能够形成纤维软骨样组织对创伤进行修补。我们发现其中愈合的组织和正常的半月板依旧存在有一定程度的差异[5]。笔者认为造成这一问题的原因可能为：①研究观察时间太短，创口中的细胞尚未增殖分化形成成熟的纤维软骨细胞；②研究中未能提供完善的条件，细胞的发育成熟缺乏相关生长因子的促进与作用[6]。
参考文献
[1]刘晋才，黄海洋.电刺激半月板无血运区愈合的组织学特征. 中华骨科杂志，1996，16：47-49.
[2]何叶，膝关节半月板损伤的研究进展[J].乐山师范学院学报，2005，（5）：55
[3]谢子康，瞿玉兴，赵洪，等.膝关节疼痛常见病因机制分析[J].现代生物医学进展，2010，（22）： 356
[4]李国锐.中医病症诊断疗效标准[J].标准化信息，1995，（02）：5.
[5]冯晶，王敬学，王国华，等.磁共振成像评价膝关节半月板损伤[J].中国组织工程研究，2013，（30） ：5545-5550
[6]黄洲，欧阳可励，胡玉明等.膝关节半月板损伤诊断[J].中国CT和MRI杂志，2008，（01） ：64-66.
【关键词】 纤维蛋白胶 半月板 损伤
一、材料与方法
1材料与方法
1.1试验材料
1.2 试验方法
1.2.1 FG的配制与FGF/FG的配制
FG的配制：对FS及凝血酶各使用1ml盐水进行溶解，而后再依次用注射器进行抽取。在进行注射时只需将两支注射器一同注入患处即可。
FGF/FG符合物的配制：分别用2 ml等渗盐水溶解bFGF 20 μg，然后用溶液分别溶解凝血酶及纤维蛋白原，使bFGF浓度为10μg/ml，再分别吸入2副注射器备用[3]。
选择成年青紫兰兔48只，体重2.0～3.0 kg。将之分为空白对照组、FS对照组和FGF/FS治疗组。以质量浓度为25 g/L的戊巴比妥钠静脉注射麻醉（25 mg/kg）。在兔子两侧膝关节的髌韧带内部各作一切口，并从此处向上将兔皮肤切开，使用半月板拉钩将操作部位的结构全部暴露出来，通过刀片在内侧的半月板前角和中央制造出一裂伤，再分别将试验药物注入其中，空白对照组在创伤制造后不做任何操作即行缝合，不予任何治疗。
2 结果
空白对照组所有兔子的半月板创伤均未能完全愈合，其内无组织填充；FS组与FGF/FS组所有兔子的半月板创伤均完全愈合，且其内已被组织填充。愈合部位新生组织颜色较半月板更深，创伤裂口与术前相比变窄，表面略微内凹，新生组织和半月板组织紧密黏连。
FS组：兔子在手术后第2周时，半月板于镜下可见损伤部位已填充有纤维蛋白，由于脱水的原因，这些组织大都较为疏松，其中偶见有少部分成纤维细胞样细胞；手术后的第6周时，半月板于镜下可见损伤部位所覆盖组织类似于纤维组织，通过偏振光显微镜可见细胞周边存在疏松的编织状胶原纤维，基质附近有少量成纤维细胞样细胞；手术后的第12周时，半月板于镜下可见损伤部位已完全被胶原纤维样组织所填充，有大量的成纤维细胞样细胞与周边组织密切连接；FGF/FS组：兔子在手术后第2周时，半月板镜下可见损伤处已填充有红色纤维组织，且存在有少量的成纤维细胞样细胞；手术后第6周时，半月板镜下可见损伤部位填充有胶原纤维，且存在有大量的成纤维细胞，部分区域偶见有纤维软骨样组织；手术后第12周时，半月板镜下可见损伤部位填充有纤维软骨样组织。细胞为椭圆或圆形，可观察到软骨囊等软骨细胞独有的组织，但愈合部位组织与周边半月板依旧存在差异，其内存在成纤维细胞样细胞。
3 讨论
半月板在膝关节的组成中十分重要，其组成成分绝大部分为非胶原蛋白，同时还存在有糖蛋白、氨基葡聚糖等，所含胶原蛋白中90%均为I型胶原蛋白。胶原纤维紧密排列，互相交错，组成了胶原束，而半月板就处在由胶原束形成的网状结构之中，其外1/3由紧密平行排列的胶原束所组成，内2/3的胶原束则相对较为分散，其内没有血管进行血液供应，蛋白多糖-胶原的比例较高[1]。
半月板的修复同其他组织一样，需要大量的细胞因子的参与，发生在有血供应的半月板区的损伤修复过程同其他损伤修复一样需经历出血、凝血、炎症反应、血肿机化、局部组织增生黏连及后期的改建。而半月板无血液供应区发生损伤后，却由于局部没有出血，不能象其他有血供应组织那样进行正常的自我修复[2]。许多研究已经证实，局部的出血和炎症反应能够为组织修复提供更多重要的细胞因子，如表皮生长因子、转化生长因子等。这些细胞因子刺激局部新生血管的形成和组织的增生，从而启动组织的损伤修复过程。许多试验研究表明碱性成纤维细胞生长因子，参与了半月板组织损伤的修复，能够促进培养的半月板细胞增殖和基质合成[3]。
相关研究曾单独使用FGF对半月板受损的情况进行了治疗，研究结果表明患处部位非血供区内的半月板基本没有发生愈合，这可能与创伤内没有支架材料、FGF没有合适载体等问题有关[4]。此外，研究结果还证明了FGF与FTA混合使用的效果要明显优于其中任一物质单用的效果，能够形成纤维软骨样组织对创伤进行修补。我们发现其中愈合的组织和正常的半月板依旧存在有一定程度的差异[5]。笔者认为造成这一问题的原因可能为：①研究观察时间太短，创口中的细胞尚未增殖分化形成成熟的纤维软骨细胞；②研究中未能提供完善的条件，细胞的发育成熟缺乏相关生长因子的促进与作用[6]。
参考文献
[1]刘晋才，黄海洋.电刺激半月板无血运区愈合的组织学特征. 中华骨科杂志，1996，16：47-49.
[2]何叶，膝关节半月板损伤的研究进展[J].乐山师范学院学报，2005，（5）：55
[3]谢子康，瞿玉兴，赵洪，等.膝关节疼痛常见病因机制分析[J].现代生物医学进展，2010，（22）： 356
[4]李国锐.中医病症诊断疗效标准[J].标准化信息，1995，（02）：5.
[5]冯晶，王敬学，王国华，等.磁共振成像评价膝关节半月板损伤[J].中国组织工程研究，2013，（30） ：5545-5550
[6]黄洲，欧阳可励，胡玉明等.膝关节半月板损伤诊断[J].中国CT和MRI杂志，2008，（01） ：64-66.