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为了建立土霉素完全抗原的制备方法，实验以土霉素为半抗原，牛血清白蛋白（BSA）为载体蛋白，利用N，N，-二环己基碳化二亚胺（DCC）、邻联甲苯胺（O—tolidine）为偶联剂，将牛血清白蛋白与土霉素偶联制备土霉素人工完全抗原。通过偶联率的计算确定邻联甲苯胺为最佳偶联剂。随后利用红外光谱分析和免疫原性测定实验鉴定了土霉素、牛血清白蛋白和邻联甲苯胺的偶联情况。结果表明，制得的土霉素完全抗原在免疫健康的Balb／c小鼠体内能刺激小鼠机体产生最高效价为25600（ELISA）的抗血清。