【摘 要】
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通过研究转化实验中加入质粒DNA的量、大肠埃希菌感受态细胞制备和质粒转化过程中冰置时间长短对感受态细胞最终转化效率的影响,分析其最佳转化效率参数,优化感受态制备和转
【基金项目】
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武汉市科技局青年科技晨光计划项目(200950199019-03)
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通过研究转化实验中加入质粒DNA的量、大肠埃希菌感受态细胞制备和质粒转化过程中冰置时间长短对感受态细胞最终转化效率的影响,分析其最佳转化效率参数,优化感受态制备和转化方法.结果表明,加入质粒(pBR322)DNA量为1～10ng,感受态制备过程中菌液冰浴时间在30～60min,以及感受态细胞加入质粒DNA并混匀后的冰置时间为30min和120 min时,其转化效率达到最高,在此范围之外,感受态的转化效率下降.本研究结果可为有高转化率要求的克隆转化实验提供有用的技术基础.
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