【摘 要】
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目的 探讨采用抗坏血酸诱导体外培养小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cell,mESC)分化为心肌细胞的可行性.方法 未分化ES细胞在滋养层上长至汇合,胰酶消化成单个细胞经旋
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院心胸外科,北京,100037
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目的 探讨采用抗坏血酸诱导体外培养小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cell,mESC)分化为心肌细胞的可行性.方法 未分化ES细胞在滋养层上长至汇合,胰酶消化成单个细胞经旋转生物反应器(RCCS)制备拟胚体(embryoid bodies,EBs),EBs贴壁后用抗坏血酸诱导分化为心肌细胞.通过光镜观察跳动的心肌细胞,采用免疫组织化学、激光共聚焦显微镜(CLSM)和RT-PCR的方法鉴定心肌细胞.结果 抗坏血酸能有效地诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的分化,诱导效率为90%;分化的心肌细胞自发而有节律地收缩,心肌肌钙蛋白T(cTnT)、α-辅肌动蛋白(α-actinin)、肌动蛋白(actin)表达阳性.此外,分化的心肌细胞还表达调控心肌发育的基因α-MHC、β-MHC.结论 抗坏血酸能有效地诱导体外培养小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞.
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