【摘 要】
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目的 筛选诱导重组人生长激素 (rhGH)工程菌高效表达的最佳条件 ,为中试及工业化发酵培养提供依据。方法 质粒PBV GH转化 4种不同宿主菌 ,比较 6种不同培养基在不同pH值、
【机 构】
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第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所; 第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复?;
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目的 筛选诱导重组人生长激素 (rhGH)工程菌高效表达的最佳条件 ,为中试及工业化发酵培养提供依据。方法 质粒PBV GH转化 4种不同宿主菌 ,比较 6种不同培养基在不同pH值、氧含量改变情况下 ,rhGH工程菌的生长和表达差异 ,筛选并确定最适宿主菌、最佳培养基及最佳诱导表达条件。结果 ①E coliDH5α为最适宿主菌 ;②TB培养基为最佳培养基 ;③培养基pH7 5～ 7 8有利于目的蛋白的表达。④在半对数生长期 (培养 4～ 5h)迅速升温 ,且菌密度控制在D6 0 0nm3 0之前诱导可获得较高的重组蛋白表达量 ,rhGH表达量占菌体总蛋白的 40 %。发酵时间为 1 0h。结论 E coliDH5α为rhGH高效表达的最适工程菌 ,E coliDH5α/PBV GH在pH7 5～ 7 8的TB培养基中发酵生长 1 0h,可使菌量最佳扩增 ,目的产物rhGH表达效率最高
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