风雨花甘露糖结合凝集素基因克隆与序列分析

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单子叶甘露糖结合凝集素具有抑制人类免疫缺陷病毒的活性。风雨花 (Zephyranthes grandiflora)球茎中含有亚基分子量为 12 KD的甘露糖结合凝集素 (ZGA)。运用同源克隆的方法设计简并引物 ,通过 3’和 5 ’RACE技术 ,从风雨花总 RNA中克隆了编码此凝集素的全长 c DNA序列 ,其开放阅读框长 4 92 bp,编码 16 4个氨基酸 ,包含信号肽序列、成熟蛋白序列和 C-末端剪切序列的前体蛋白。成熟蛋白由 10 6个氨基酸残基组成 ,分子量为 11.6KD。成熟蛋白在氨基酸水平上与石蒜凝集素、雪花莲凝集素、水仙凝集素和君子兰凝集素分别有 71.8%、81%、81.8%和 84 .5 %的同源性 ;在 Blocks数据库中检索 ZGA蛋白氨基酸序列的结构域 ,发现有 3个凝集素功能结构域 ,并具有 3个典型的甘露糖专一结合位点盒 (QDNY)
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