论文部分内容阅读
目的观察痹肿消汤干预前后的早期活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)蛋白质的双向凝胶电泳(2-DE)图谱,并分析其差异表达的蛋白质,寻找RA疾病相关蛋白,探讨痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法 18例早期活动性RA患者随机分为两组,治疗组9例口服痹肿消汤(白花蛇舌草25g肿节风30g丹参15g络石藤20g骨碎补15g薏苡仁30g等15味中药),对照组9例口服甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)和普威(nimesulide tablets),疗程均为3个月。9名健康成年人为正常对照组。健康成年人及RA患者治疗前后分别采血10mL,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,抽提外周血单个核细胞中的蛋白,采用固相pH梯度(IPG)2-DE分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质。凝胶经考染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。同时运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证部分差异蛋白质。结果分别获得健康人、RA患者治疗前、后PBMCs总蛋白2-DE图谱,通过RA患者治疗前与健康人比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,其中8个蛋白质点在RA中表达上调,6个表达下调。与对照组治疗后比较,治疗组治疗后有5个蛋白质表达差异更为明显。RT-PCR方法证实,ApoA-I在健康人、RA治疗组、对照组的表达水平与2-DE结果一致。结论 (1)RA患者PBMCs存在一些差异表达的蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素;(2)痹肿消汤可能通过对RA患者PBMCs中某些蛋白质表达的调控达到治疗目的。