敖汉细毛羊BMP4基因质粒的构建及在成纤维细胞中表达量的研究

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wang____jiang

【摘要】

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旨在构建敖汉细毛羊BMP4基因的质粒及转染成纤维细胞后研究基因表达量的变化。以30日龄的敖汉细毛羊胚胎为研究对象。首先,通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中BMP4基因

【作者】

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张梦瑶杨峰刘开东刘积凤柳楠贺建宁薛明

【机构】

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青岛农业大学动物科技学院,青岛畜牧兽医研究所,内蒙古农业大学,全国畜牧总站

【出处】

：

华北农学报

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

敖汉细毛羊成纤维细胞质粒构建 BMP4基因转染 RT-PCR Western Blot

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31402047);国家绒毛用羊产业技术体系专项资金(CARS-39-05);青岛农业大学高层次人才科研基金项目(631410)

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旨在构建敖汉细毛羊BMP4基因的质粒及转染成纤维细胞后研究基因表达量的变化。以30日龄的敖汉细毛羊胚胎为研究对象。首先,通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中BMP4基因序列信息设计1对引物,通过PCR反应扩增获得BMP4基因片段、将得到的BMP4基因连接到pEASYTM-T1载体,构建pEASYTM-T1-BMP4重组质粒并转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞提取质粒进行酶切鉴定。鉴定正确后构建pcDNA3.1-BMP4重组质粒,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞;其

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