探讨肝细胞核因子1A (HNF1A)对人胰腺癌PANC1细胞株吉西他滨联合白蛋白紫杉醇耐药性的影响及其作用机制。
方法选取2012年3月至2017年5月间中山大学孙逸仙纪念医院胆胰外科78例行手术切除后接受吉西他滨联合白蛋白紫杉醇化疗方案的局部晚期或远处转移的胰腺癌患者，采用qPCR法检测胰腺癌组织HNF1A表达水平，根据HNF1A表达水平的中位数将患者分为高表达组(39例)和低表达组(39例)，分析HNF1A表达与肿瘤临床病理参数及患者生存期的相关性；采用qPCR法检测3株敏感胰腺癌细胞株(BxPC-3、CFPAC-1和L3.6pl)和4株耐药胰腺癌细胞株(PANC1、MIA PaCa-2、Hs766T和Mpanc96)HFN1A mRNA表达水平。以携带插入HNF1AcDNA质粒的慢病毒感染方法构建过表达HNF1A的PANC1 (HNF1A组)，以携带空质粒的慢病毒感染的PANC1为对照组，采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测两组PANC1细胞HNF1A和ATP结合盒转运蛋白家族中的ABCC1 mRNA及蛋白表达；采用MTT法检测两组细胞对吉西他滨和白蛋白紫杉醇的半抑制浓度(IC50)；采用流式细胞术检测两组细胞凋亡率。
结果HNF1A高表达组患者平均生存期显著长于低表达组(17.9个月比12.4个月)，差异有统计学意义(P<0.001)；胰腺癌组织HNF1A低表达与TNM分期晚、有神经浸润、患者生存期短相关。耐药的PANC1细胞HNF1A mRNA表达水平较敏感的BxPC-3细胞下调6.73倍，差异具有统计学意义(P<0.001)。HNF1A组的ABCC1 mRNA和蛋白表达水平较对照组显著下降(0.012±0.004比0.047±0.008、0.281±0.040比0.832±0.046，P＝0.003、P<0.001)。HNF1A组PANC1细胞对吉西他滨和白蛋白紫杉醇的IC50较对照组显著下降[(26.31±2.91)μmol/L比(72.63±4.07)μmol/L]，细胞凋亡率显著升高[(40.18±1.64)%比(21.31±1.98)%]，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。
结论HNF1A可能通过下调ABCC1表达介导胰腺癌细胞产生吉西他滨和白蛋白紫杉醇耐药性。