【摘 要】
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目的探讨JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢相关基因的影响。方法构建JAZF1小发夹RNA(shRNA)表达载体并转染3T3-L1细胞,实时荧光定量PCR(RT-QPCR)和蛋白印迹法检测JAZ
【机 构】
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重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室
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目的探讨JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢相关基因的影响。方法构建JAZF1小发夹RNA(shRNA)表达载体并转染3T3-L1细胞,实时荧光定量PCR(RT-QPCR)和蛋白印迹法检测JAZF1 mRNA和蛋白水平的表达;氢三放射示踪法检测3T3-L1细胞糖摄取率;蛋白印记法检测糖、脂代谢相关基因蛋白水平;油红O染色检测脂肪细胞甘油三酯(TG)含量变化。结果成功构建JAZF1-shRNA;转染脂肪细胞48 h后,JAZF1 mRNA和蛋白水平明显低于对照组(P<0.05);氢3放射性示踪法显示转染组葡萄糖摄取率明显降低(P<0.05);PPAR-γ蛋白表达升高(P<0.05),激素敏感脂肪酶(HSL)、内脏脂肪素(Visfatin)、胰岛素诱导基因-2(Insig-2)蛋白表达降低(均P<0.05);油红O染色显示JAZFl转染组细胞内脂质积聚明显,比对照组升高约25%(P<0.05)。结论 JAZF1基因抑制可减少基础糖转运,增加脂质与胆固醇合成,减少脂质分解并减少相关脂肪细胞因子的表达。
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