【摘 要】
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目的 探讨雷帕霉素(RAPA)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤后脾γδT淋巴细胞与肺巨噬细胞相互作用的影响.方法 6～8周龄健康雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院呼吸科
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目的 探讨雷帕霉素(RAPA)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤后脾γδT淋巴细胞与肺巨噬细胞相互作用的影响.方法 6～8周龄健康雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、LPS组、RAPA组及LPS+RAPA组.气管内注射LPS构建小鼠急性肺损伤模型,采用免疫磁珠法提纯给药1 d后处死的小鼠脾γδT淋巴细胞和肺巨噬细胞,调整细胞浓度为106 个/ml;24孔板分成PBS、LPS、RAPA及LPS+RAPA共4组,每组又分为以下3个复孔:单独培养的脾γδT淋巴细胞、单独培养的肺巨噬细胞及按1:1混合培养的脾γδT淋巴细胞和肺巨噬细胞.24 h后采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定培养上清液中干扰素γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;采用实时定量聚合酶链反应法测定培养的细胞中IFN-γ及TNF-α mRNA的表达.结果 LPS组支气管肺泡灌洗液的总细胞和淋巴细胞浓度明显大于PBS组和LPS+RAPA组(P＜0.05).脾脏γδT淋巴细胞与肺组织巨噬细胞按1:1昆合培养时,LPS组上清液IFN-γ高于其他3组(P＜0.05),而TNF-α只高于RAPA组和LPS+RAPA组(P＜0.05).混合培养时LPS组IFN-γmRNA的表达明显高于PBS组和RAPA组(P＜0.05).结论 RAPA能显著抑制小鼠LPS诱导急性肺损伤后脾脏γδT淋巴细胞和肺组织巨噬细胞混合培养时IFN-γ和TNF-α的分泌.
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