目的 探讨二氢青蒿素(DHA)体外诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的分子作用机制.方法 体外培养人胃癌SGC7901细胞,不同浓度(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μmol/l) DHA作用24、48、72 h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖；DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率；分光光度法检测细胞半胱氨酰大冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)和Caspase-9活性变化；线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)荧光染色检测线粒体膜电位(△Ψm)的改变；Western blot法分别测定B-细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bax蛋白的表达水平；Western blot检测胞质中细胞色素C( Cyto C)的含量变化.结果 DHA对SGC7901细胞增殖抑制具有明显量效和对效关系；与对照组(1.88±0.25)比较,不同浓度DHA作用人胃癌SGC7901细胞24h后,细胞凋亡率[(4.21±0.83)％、(6.92±1.26)％、(9.78±2.55)％、(13.93±2.94)％、(16.02±3.83)％]明显增加(P＜0.05)；与对照组(0.091±0.007、0.079±0.006、100.000±0.000)比较,Caspase-3(0.094±0.008、0.196±0.014、0.288±0.017、0.326±0.024、0.491±0.042)和Caspase-9 (0.082±0.008、0.154±0.010、0.176 ±0.012、0.217 ±0.015、0.268±0.024)活性逐步升高(P＜0.05)；△Ψm( 74.18±7.84、70.08±6.53、58.66±2.38、48.79±1.31、31.24±0.73)逐渐下降(P＜0.05)；不同浓度DHA处理组bax蛋白表达逐渐升高(p＜0.05),bcl-2表达逐步下降(P＜0.05),bcl-2/bax比值(2.37±0.24、1.51±0.21、0.82±0.16、0.64±0.14、0.37±0.07)显著降低,与对照组(3.11±0.28)比较有剂量依赖趋势(P＜0.05)；与对照组(0.18±0.04)比较,不同浓度DHA均能剂量依赖地诱导胞质Cyto C表达(0.21±0.05、0.25±0.06、0.38±0.08、0.39±0.09)增加(P＜0.05).结论 DHA具有促进胃癌细胞凋亡的作用,且有剂量依赖的趋势,其机制与线粒体凋亡途径有关。
二氢青蒿素通过线粒体依赖性途径诱导人胃癌细胞凋亡的机制
【摘 要】
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目的 探讨二氢青蒿素(DHA)体外诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的分子作用机制.方法 体外培养人胃癌SGC7901细胞,不同浓度(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μmol/l) DHA作用24、48、72 h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖；DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率；分光光度法检测细胞半胱氨酰大冬氨酸特异性蛋白酶3(C
【机 构】
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063000河北唐山市工人医院肿瘤外科,063000河北唐山市工人医院肿瘤外科,063000河北唐山市工人医院肿瘤外科,063000河北唐山市工人医院肿瘤外科,063000河北唐山市工人医院肿瘤外科,
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2012年29期
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