猕猴桃基因组DNA文库的构建

来源 :果树学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：varylife

【摘要】

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采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Bruno)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回

【作者】

：

许文平徐昌杰陈昆松张上隆

【机构】

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浙江大学果实分子生理与生物技术实验室/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室

【出处】

：

果树学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

猕猴桃基因组DNA文库 PCR Kiwifruit Genomic DNA library PCR

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采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Bruno)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回收长为14～23kb的酶切片段.部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与Lambda FIX(R)Ⅱ载体连接,连接产物用GigapacK(R)ⅢPackaging Extract进行包装,最后得到含有1.05×106pfu的基因组文库,扩增后文库滴度为2.5×1pfu/m

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