【摘 要】
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目的:探讨CR6相互作用因子1(CR6-interacting factor 1,CRIF1)在棕榈酸诱导的小鼠心肌细胞(mouse cardiomyocytes,MCMs)凋亡中的作用及相关机制研究.方法:将MCMs分为对照组和
【机 构】
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陆军军医大学(第三军医大学)研究生院,重庆,400038西部战区总医院心内科,四川 成都,610083;陆军军医大学(第三军医大学)研究生院,重庆400038;西部战区总医院心内科,四川 成都6100
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目的:探讨CR6相互作用因子1(CR6-interacting factor 1,CRIF1)在棕榈酸诱导的小鼠心肌细胞(mouse cardiomyocytes,MCMs)凋亡中的作用及相关机制研究.方法:将MCMs分为对照组和棕榈酸组(300μmol/L棕榈酸干预24 h).利用特异性siRNA敲减MCMs中CRIF1的表达,进一步将棕榈酸组分为溶剂组、非特异阴性siRNA组和CRIF1特异性siRNA组.为进一步验证CRIF1在棕榈酸诱导的MCMs损伤中的具体机制,将敲减CRIF1表达的MCMs分为DMSO组和N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)组,并给予相同条件的棕榈酸干预.用RT-qPCR法、Western blot和免疫荧光检测细胞中CRIF1 mRNA和蛋白表达;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平;DHE染色及ELISA试剂盒检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的水平.结果:棕榈酸干预后MCMs中CRIF1的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);在棕榈酸作用下,MCMs的凋亡率明显升高,敲减CRIF1表达后MCMs的凋亡率进一步升高(P<0.05);在棕榈酸诱导下MCMs内的ROS含量明显增加,而下调CRIF1表达可使细胞内ROS的含量进一步增加;与DMSO组比较,NAC组MCMs的凋亡率及ROS水平均明显降低(P<0.05).结论:CRIF1可通过抑制氧化应激反应减轻高脂诱导的MCMs凋亡.
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