恶性疟原虫复合多表位基因的原核表达和多克隆抗体制备

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原核表达恶性疟原虫多期多表位基因并制备其多克隆抗体。在前期构建恶性疟原虫复合多期多表位重组真核表达载体的基础上,将测序正确的AMAMEG基因克隆入原核表达载体pGEx4T-1并诱导表达。采用包涵体洗涤的方式纯化目的蛋白,以AMA-1抗体对纯化蛋白进行Western-blot分析。将纯化的融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。通过PCR成功获得长度为1000bp的恶性疟原虫AMA-1胞外域基因片段,获得了与多表位基因连接后的AMAMEG基因。通过诱导表达,显示在相对分子量约95000处有预计大小的特异性条带,表明
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