丙型肝炎病毒5'NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用

来源 :自然科学进展：国家重点实验室通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yhmlivefor53

【摘要】

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为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒（HCV）药物的筛选及评价，将HCV5′NCR－C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体，通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性

【作者】

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王小红王升启等

【机构】

：

军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所

【出处】

：

自然科学进展：国家重点实验室通讯

【发表日期】

：

2001年4期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒反义寡核苷酸荧光素酶 HCV5′NCR 转基因细胞模型药物筛选药物评价

【基金项目】

：

国家“八六三”计划(编号:102-08-04-01),,军队“九五”重点课题(编号:96Z007)资助项目

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为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒（HCV）药物的筛选及评价，将HCV5′NCR－C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体，通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定，获得HCV5′NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-neo4，将其转染HepG2xleq,x G418筛选，从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706。该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性，转基因拷贝数为140。利用该细胞株，通过脂质体介导，对3条针对HCV调控基因的

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