小鼠白细胞介素5真核表达质粒pVAX1-mIL-5的构建及其体外表达

来源 :生殖医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ygs850723

【摘要】

：

目的构建能表达小鼠白细胞介素5(mIL-5)的质粒并鉴定其蛋白的体外瞬时表达. 方法以含有mIL-5cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得小鼠IL-5基因片段后,定向插

【作者】

：

何柳媚潘善培谢琪璇肖銮娟彭雅琳董志炜

【机构】

：

暨南大学生殖免疫研究所

【出处】

：

生殖医学杂志

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

白细胞介素5 质粒构建体外表达黏膜免疫佐剂 IL-5 Construction of plasmid Expression in vitro Muc

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目的构建能表达小鼠白细胞介素5(mIL-5)的质粒并鉴定其蛋白的体外瞬时表达. 方法以含有mIL-5cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得小鼠IL-5基因片段后,定向插入真核表达载体pVAX1中,获得重组表达质粒pVAX1-mIL-5.通过双酶切、PCR及插入片段序列测定对质粒进行鉴定.采用间接免疫荧光技术检测pVAX1-mIL-5在HeLa细胞的瞬时表达.结果酶切、PCR及测序鉴定证实,插入片段正确,间接免疫荧光检测表明其可以在HeLa细胞中瞬时表达. 结论构建的真核表达质粒pVA

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