【摘 要】
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目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方
【机 构】
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南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,南京,210029;滨州医学院病原生物学教研室;云南省大理白族自治州血吸虫病防治研究所;云南省大理白族自治州巍山县血吸虫病防治研究所
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目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法.方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件.并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性.结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4 μg/ml包被酶标板,血清浓度为1:100,37℃孵育60 min,二抗为37℃孵育30 min.该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%.结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测.
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