【摘 要】
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目的:观察补阳还五汤预处理对小鼠局灶性脑缺血后半暗带细胞自噬水平的影响,进一步探讨其神经保护的作用机制。方法:将80只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81273989,81302953);湖南省教育厅创新平台项目(编号:12K089);湖南省益阳市科技厅一般项目(编号:YK1541);湖南中医药大学研究生科研创新项目(编号:2015CX03)
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目的:观察补阳还五汤预处理对小鼠局灶性脑缺血后半暗带细胞自噬水平的影响,进一步探讨其神经保护的作用机制。方法:将80只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+Rapamycin(Rapa)组、Rapa组及5%DMSO组,每组12只,分别给以Rapamycin腹腔注射诱导细胞自噬及补阳还五汤灌胃给药,预处理7d后采用大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法复制小鼠脑缺血模型,造模后3h运用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积,计算相对梗死体积,HE染色观察半暗带组织病理形态变化,Western blot法检测自噬标记性蛋白LC3-II/LC3-I比值及P62蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组相对梗死体积增加(P<0.05),半暗带组织形态出现缺血后病理改变,LC3-II/LC3-I比值增加(P<0.05),P62蛋白则表达减少(P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组相对梗死体积减少(P<0.05),半暗带组织病理形态明显改善,LC3-II/LC3-I比值减少(P<0.05),同时P62表达增加(P<0.05),而Rapa组则与补阳还五汤组相反(均P<0.05),5%DMSO组无显著差异(P均>0.05);与补阳还五汤组比较,补阳还五汤+Rapa组相对梗死体积增加(P<0.05),半暗带组织病理形态恶化,LC3-II/LC3-I比值增加(P<0.05),同时P62表达减少(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能通过抑制脑缺血后半暗带自噬水平,减轻局灶性脑缺血小鼠脑组织损伤,发挥神经保护作用。
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