牛乳腺炎标志物血清淀粉样蛋白A3的原核表达及其单克隆抗体的制备

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：christain008

【摘要】

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为了表达牛乳腺相关血清淀粉样蛋白A3(M-SAA3)基因,获得其重组蛋白及单克隆抗体(MAb),本研究将编码M-SAA3的基因片段经密码子优化后接入载体pET-30a(+)中,然后转入大肠杆菌BL

【作者】

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樊一明刘鑫楠魏治静包永占董维亚张小兵吴萌

【机构】

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河北农业大学动物医学院（中兽医学院）,河北省科学院生物研究所,河北省动物疫病预防控制中心

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2021年3期

【关键词】

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牛血清淀粉样蛋白A3(M-SAA3) 乳腺炎原核表达单克隆抗体(MAb) bovine mammary-associated serum amyloid p

【基金项目】

：

河北省重点研发计划项目“两种急性期蛋白用于奶牛乳房炎诊断的免疫快速检测技术研究”(19222814D),河北省科学院科技计划项目“奶牛隐性乳腺炎诊断标志物抗体研制及定量检测技术研究”(19302)

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为了表达牛乳腺相关血清淀粉样蛋白A3(M-SAA3)基因,获得其重组蛋白及单克隆抗体(MAb),本研究将编码M-SAA3的基因片段经密码子优化后接入载体pET-30a(+)中,然后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。以镍柱纯化蛋白后,免疫BALB/c小鼠制备M-SAA3 MAb。结果显示,扩增的M-SAA3基因序列无误;M-SAA3基因成功转入表达载体;菌液的诱导表达D600值=0.8为最优条件;重组蛋白纯度可达98%,浓度为1.146 mg/m L;制得7株MAb效价均>1∶160

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