人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂在果蝇细胞中的稳定表达及鉴定

来源 :广西医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xys0709

【摘要】

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目的：在果蝇S2细胞中表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（ SLPI ）并对其生物学性质进行初步测定。方法以A549细胞RNA为模板，利用反转录PCR方法扩增得到SLPI蛋白的编码序列，并将其克隆

【作者】

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阚学通何金生

【机构】

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安徽医科大学免疫学教研室,北京交通大学生命科学与生物工程研究院

【出处】

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广西医学

【发表日期】

：

2014年1期

【关键词】

：

分泌性白细胞蛋白酶抑制剂果蝇表达系统稳定表达 Secretary leukocyte protease inhibitor Drosophila expre

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目的：在果蝇S2细胞中表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（ SLPI ）并对其生物学性质进行初步测定。方法以A549细胞RNA为模板，利用反转录PCR方法扩增得到SLPI蛋白的编码序列，并将其克隆到表达载体pMT/V5-His A中，构建pMT/V5-SLPI 表达质粒，通过与抗性筛选质粒pCoHygro 共转染S2细胞，经潮霉素B筛选3～4周，得到能够稳定表达SLPI蛋白的多克隆细胞系。经CuSO 4诱导表达后，用RT-PCR及Western blot分析SLPI基因的转录和表达。结果获得了抗性稳定的多克隆

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