【摘 要】
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目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶（Protease,PR）,用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选.方法根据HIV-1 HXB2株PR DNA序列设计引
【机 构】
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第二军医大学微生物学教研室,安徽医科大学病理学教研室,上海长海医院输血科,上海市公共卫生中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30472050）,上海市科技攻关计划（05dz19317）.
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目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶（Protease,PR）,用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选.方法根据HIV-1 HXB2株PR DNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1 PR的DNA编码序列,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体进行测序.将HIV-1 PR DNA克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE鉴定,并用HI
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