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摘 要：了解规模化猪场PR野毒感染状况和免疫效果，为规模化猪场伪狂犬病控制和净化提供科学依据。采用阻断ELISA方法，对采自11个规模场户的379份血清进行PR-gE野毒抗体检测，对其中的195份血清进行PR-gB抗体检测。被调查的11个规模场中有6个规模场PR-gE抗体为阳性，群体阳性率为54.55 %，个体阳性率54.09 %。阳性率公猪为58.33 %、母猪为83.44 %，仔猪为5.08 %、育肥猪为39.10 %；PR-gB抗体阳性率公猪为100 %、母猪为100 %，仔猪为73.33 %。甘肃省规模猪场PR-gE抗体的群体阳性率和个体阳性率处于较高水平；免疫猪群的高PR-gE抗体阳性率是值得重视的问题；甘肃省猪伪狂犬病上升势头明显。
关键词：PR；gE抗体；gB抗体；阻断ELISA
中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2015）11-0050-03
猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的一种高度接触性传染病。种猪主要表现为繁殖障碍：母猪产死胎、木乃伊胎和流产，对仔猪危害最严重，死亡率可达100 %；成年猪多为隐性感染。PRV感染会引起机体免疫抑制，而且猪体可长期带毒和排毒，容易并发感染其他疫病。2001年，我省首次发现了本病，感染阳性率为39.06 %[1]，2006年感染阳性率为15.28 %，免疫抗体阳性率为60.70 %[2]，2007年免疫抗体阳性率为63.52 %[3]。为了解当前甘肃省规模养猪场猪PR感染情况，我们选择中小规模养猪比较集中地区的11个养殖场进行了感染抗体检测，现将结果报告如下：
1 材料与方法
1.1 样品采集
随机选择全省9个市州的11个规模场户采集并分离血清。共采集血清379份，其中公猪24份、母猪163份、仔猪59份、育肥猪133份。
1.2 检测方法与结果判定
1.2.1 阻断ELISA
按试剂说明书操作。
1.2.2 结果判定
阴性对照平均OD630nm—阳性对照平均OD630nm≥0.3（gB为0.4）時试验成立，计算S/N值。其中：S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照平均OD630nm值。
1.2.2.1 PR-gE抗体
当S/N≤0.35，判定为阳性；0.350.4，判为阴性。
1.2.2.2 PR-gB抗体
当S/N≤0.6，判定为阳性；0.60.7，判为阴性。
1.3 试剂来源
ELISA试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司，批号：PR-gE抗体：20140813、150301；PR-gB抗体：150101、150403。
2 检测结果与分析
2.1 PR-gE抗体检测
对采自11个规模养猪场的378份血清进行PR-gE抗体检测，11个场中6个场检出PR-gE抗体猪，群体阳性率为54.55 %；检出PR-gE抗体阳性血清205份，个体阳性率54.09 %。其中7个育肥猪群中有4个育肥猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率为57.14 %，个体阳性率为39.10 %；2个仔猪群中有1个仔猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率50 %，个体阳性率为 5.08 %；2个公猪群中有1个公猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率50 %，个体阳性率为58.33 %；3个母猪群有两个群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率66.67 %，个体阳性率为80.21 %（150/187）；各场结果见表1。
2.2 PR-gB抗体检测
共对2个大型规模场的195份血清进行了PR-gB抗体检测。阳性份数187份，阳性率为95.90 %。各场结果详见表2。
3 小结与讨论
3.1 群体和个体阳性率
甘肃省规模猪场PR-gE抗体的群体阳性率和个体阳性率处于较高水平。本次调查结果表明，11个场的群体阳性率为54.55 %，个体阳性率为54.09 %；而江西省规模种猪场的PR-gE抗体群体阳性率为40.00 %[4]。本次调查中育肥猪群群体阳性率为57.14 %，个体阳性率为39.10 %；而川渝地区育肥猪的PR-gE抗体个体阳性率为18.11 %[5]。本次调查中种猪的群体阳性率为60.00 %，个体阳性率为90.91 %（150/165），而福建省的种猪个体阳性率为19.39 %[6]。
3.2 免疫猪群PR抗体阳性率
免疫猪群的高PR-gE抗体阳性率是值得重视的问题。本次调查中，对两个规模场的195份样品同时进行了PR-gB和PR-gE抗体检测，结果PR-gB抗体阳性187份，阳性率为95.90 %；PR-gE抗体阳性153份，阳性率为78.46 %。说明在免疫抗体水平很高的情况下，猪群仍然存在高感染抗体的现象，这种现象在猪伪狂犬病的防控中应当引起高度重视。
3.3 甘肃省猪伪狂犬病发病趋势
甘肃省的猪伪狂犬病上升势头明显。本次对11个规模养猪场的379份血清进行PR-gE抗体检测，个体阳性率为54.09 %。2001年我省对39个养猪场的调查结果表明，个体阳性率为39.06 %[1]；2006年的调查结果为个体阳性率15.28 %[2]；2011年的调查结果为18.4 %[3]。
4 防控建议
4.1 阳性场
阳性场应定时监测gE和gB抗体，特别是对母源抗体快要消失的后备猪。根据猪场血清学检测结果，结合临床实际情况，制定适合本场猪群的免疫程序和综合控制（净化）方案施，尽力遏制场内伪狂犬病的流行。
4.2 疫苗与器械的选择
选用优质gE基因缺失疫苗强化后备猪免疫，注重后备猪的选择，加强定期监测工作。仔猪采用滴鼻免疫方式，以建立牢固的局部粘膜免疫和早期的主动免疫力，有效预防野毒的潜伏感染和杜绝母源抗体的干扰。滴鼻免疫建议采用专用的滴鼻器，将疫苗液滴喷成均匀的雾状，以利于疫苗的吸收。
4.3 建议使用的免疫方案
阳性猪场对仔猪采取如下方法进行免疫：0日龄滴鼻免疫1次，30日龄和70日龄各进行肌肉注射免疫1次。12～13周龄及配种前1个月再各免疫1次。
阴性猪场种猪可采用一年3次普免，仔猪8～9周龄和11～12周龄各免疫1次，后备猪在配种前间隔1个月免疫2次，末次在配种前1个月进行。
4.4 新引进种猪
新引进种猪必须进行伪狂犬病检疫，并隔离饲养。 2个月后抽血样检查，抗体或野毒感染抗体为阴性者方可与本场其他猪混群饲养；所有猪群每半年应作一次血清学鉴别检查，严格隔离检测出的野毒感染阳性猪，并将其淘汰不作种猪用或进行扑杀；健康猪场每3个月应进行1次血清学抽查，抽检母猪数量不得少于25 %。检测发现的阳性猪立即淘汰，同时免疫阴性猪，并加强监测。
参考文献：（6篇，略）
关键词：PR；gE抗体；gB抗体；阻断ELISA
中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2015）11-0050-03
猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的一种高度接触性传染病。种猪主要表现为繁殖障碍：母猪产死胎、木乃伊胎和流产，对仔猪危害最严重，死亡率可达100 %；成年猪多为隐性感染。PRV感染会引起机体免疫抑制，而且猪体可长期带毒和排毒，容易并发感染其他疫病。2001年，我省首次发现了本病，感染阳性率为39.06 %[1]，2006年感染阳性率为15.28 %，免疫抗体阳性率为60.70 %[2]，2007年免疫抗体阳性率为63.52 %[3]。为了解当前甘肃省规模养猪场猪PR感染情况，我们选择中小规模养猪比较集中地区的11个养殖场进行了感染抗体检测，现将结果报告如下：
1 材料与方法
1.1 样品采集
随机选择全省9个市州的11个规模场户采集并分离血清。共采集血清379份，其中公猪24份、母猪163份、仔猪59份、育肥猪133份。
1.2 检测方法与结果判定
1.2.1 阻断ELISA
按试剂说明书操作。
1.2.2 结果判定
阴性对照平均OD630nm—阳性对照平均OD630nm≥0.3（gB为0.4）時试验成立，计算S/N值。其中：S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照平均OD630nm值。
1.2.2.1 PR-gE抗体
当S/N≤0.35，判定为阳性；0.35
1.2.2.2 PR-gB抗体
当S/N≤0.6，判定为阳性；0.6
1.3 试剂来源
ELISA试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司，批号：PR-gE抗体：20140813、150301；PR-gB抗体：150101、150403。
2 检测结果与分析
2.1 PR-gE抗体检测
对采自11个规模养猪场的378份血清进行PR-gE抗体检测，11个场中6个场检出PR-gE抗体猪，群体阳性率为54.55 %；检出PR-gE抗体阳性血清205份，个体阳性率54.09 %。其中7个育肥猪群中有4个育肥猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率为57.14 %，个体阳性率为39.10 %；2个仔猪群中有1个仔猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率50 %，个体阳性率为 5.08 %；2个公猪群中有1个公猪群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率50 %，个体阳性率为58.33 %；3个母猪群有两个群PR-gE抗体为阳性，群体阳性率66.67 %，个体阳性率为80.21 %（150/187）；各场结果见表1。
2.2 PR-gB抗体检测
共对2个大型规模场的195份血清进行了PR-gB抗体检测。阳性份数187份，阳性率为95.90 %。各场结果详见表2。
3 小结与讨论
3.1 群体和个体阳性率
甘肃省规模猪场PR-gE抗体的群体阳性率和个体阳性率处于较高水平。本次调查结果表明，11个场的群体阳性率为54.55 %，个体阳性率为54.09 %；而江西省规模种猪场的PR-gE抗体群体阳性率为40.00 %[4]。本次调查中育肥猪群群体阳性率为57.14 %，个体阳性率为39.10 %；而川渝地区育肥猪的PR-gE抗体个体阳性率为18.11 %[5]。本次调查中种猪的群体阳性率为60.00 %，个体阳性率为90.91 %（150/165），而福建省的种猪个体阳性率为19.39 %[6]。
3.2 免疫猪群PR抗体阳性率
免疫猪群的高PR-gE抗体阳性率是值得重视的问题。本次调查中，对两个规模场的195份样品同时进行了PR-gB和PR-gE抗体检测，结果PR-gB抗体阳性187份，阳性率为95.90 %；PR-gE抗体阳性153份，阳性率为78.46 %。说明在免疫抗体水平很高的情况下，猪群仍然存在高感染抗体的现象，这种现象在猪伪狂犬病的防控中应当引起高度重视。
3.3 甘肃省猪伪狂犬病发病趋势
甘肃省的猪伪狂犬病上升势头明显。本次对11个规模养猪场的379份血清进行PR-gE抗体检测，个体阳性率为54.09 %。2001年我省对39个养猪场的调查结果表明，个体阳性率为39.06 %[1]；2006年的调查结果为个体阳性率15.28 %[2]；2011年的调查结果为18.4 %[3]。
4 防控建议
4.1 阳性场
阳性场应定时监测gE和gB抗体，特别是对母源抗体快要消失的后备猪。根据猪场血清学检测结果，结合临床实际情况，制定适合本场猪群的免疫程序和综合控制（净化）方案施，尽力遏制场内伪狂犬病的流行。
4.2 疫苗与器械的选择
选用优质gE基因缺失疫苗强化后备猪免疫，注重后备猪的选择，加强定期监测工作。仔猪采用滴鼻免疫方式，以建立牢固的局部粘膜免疫和早期的主动免疫力，有效预防野毒的潜伏感染和杜绝母源抗体的干扰。滴鼻免疫建议采用专用的滴鼻器，将疫苗液滴喷成均匀的雾状，以利于疫苗的吸收。
4.3 建议使用的免疫方案
阳性猪场对仔猪采取如下方法进行免疫：0日龄滴鼻免疫1次，30日龄和70日龄各进行肌肉注射免疫1次。12～13周龄及配种前1个月再各免疫1次。
阴性猪场种猪可采用一年3次普免，仔猪8～9周龄和11～12周龄各免疫1次，后备猪在配种前间隔1个月免疫2次，末次在配种前1个月进行。
4.4 新引进种猪
新引进种猪必须进行伪狂犬病检疫，并隔离饲养。 2个月后抽血样检查，抗体或野毒感染抗体为阴性者方可与本场其他猪混群饲养；所有猪群每半年应作一次血清学鉴别检查，严格隔离检测出的野毒感染阳性猪，并将其淘汰不作种猪用或进行扑杀；健康猪场每3个月应进行1次血清学抽查，抽检母猪数量不得少于25 %。检测发现的阳性猪立即淘汰，同时免疫阴性猪，并加强监测。
参考文献：（6篇，略）