人源醛酮还原酶7A2融合蛋白的纯化及其对苯代谢产物的催化活性

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyoucao654321
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目的使用FPLC系统纯化人源醛酮还原酶(AKR)7A2融合蛋白,并检测纯化的AKR7A2蛋白对苯的代谢产物的催化活性。方法将含有His—AKR7A2的重组质粒转化至BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导AKR7A2融合蛋白的大量表达;利用FPLC系统通过HiTrap亲和柱和G25Sephadex凝胶色谱柱纯化AKR7A2融合蛋白,经SDS—PAGE和Westemblot鉴定。采用酶活性实验检测纯化的重组AKR7A2蛋白对苯甲醛、双苯醌和反向,反向-2,4-二烯-1,6-己二酮(MUC)的底物特异性。结果使用F
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