柱层析法纯化且人肿瘤坏死因子α及其抑瘤作用

来源 :复旦学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crystal_z
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半合成人肿瘤坏死因子TNF-α在大肠杆菌中高表达,发酵后收集菌体经超声破碎,然后在12000r/min4℃离心10min,上清经60℃热处理30min,离心上清用60%饱和度的硫酸铵沉淀,再依次经过SephadexG-25,DEAE-52纤维素和Sephadex-G-75柱层析,得到的纯化rhTNf-a比活性为2×10^7u/mg,回收率为24%,经过SDS-PAGE电泳和HPLC鉴定,纯度达95
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