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目的：评价分枝杆菌热休克蛋白65（Hsp65）基因检测分枝杆菌皮肤感染标本的敏感性和特异性。方法：多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的10％非变性聚丙烯酰胺凝胶法直接检测Hsp65基因，PCR-RFLP检测阳性的标本再经Hsp65基因和16SrRNADNA基因测序验证。结果：与培养法相比，PCR-RFLP法检测临床分枝杆菌皮肤感染的敏感性为30％（3／10），特异性为100％（10／10）。结论：分枝杆菌PCR-RFLP的10％非变性聚丙烯酰胺凝胶法可用于分枝杆菌皮肤感染的临床检测。