KLF5在TNFα诱导的SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡中的作用

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目的

探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对SK–BR–3乳腺癌细胞中Krüppel样因子5(KLF5)表达的影响,明确KLF5在TNFα诱导SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡中的作用。

方法

用不同浓度TNFα(0、1、5、10、20 μg/L)刺激SK–BR–3乳腺癌细胞不同时间(0、6、12、24、36 h),采用Western印迹方法检测KLF5表达水平;用实时定量PCR(qRT–PCR)检测TNFα刺激对SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡基因表达的影响,qRT–PCR和流式细胞术观察过表达KLF5对SK–BR–3乳腺癌凋亡的影响。

结果

TNFα刺激SK–BR–3乳腺癌细胞后,随着刺激浓度的增高,KLF5表达水平呈剂量和时间依赖性逐渐降低。qRT–PCR结果显示,TNFα可上调SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡基因cascpase3、caspase9和bax表达,并下调bcl–2表达水平。构建pAd–GFP和pAd–GFP–KLF5腺病毒表达载体,在SK–BR–3乳腺癌细胞中过表达GFP或GFP–KLF5,再给予TNFα刺激,qRT–PCR和流式细胞术观察结果显示,过表达外源性KLF5可抑制TNFα诱导的SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡。

结论

TNFα可抑制SK–BR–3乳腺癌细胞中KLF5表达,KLF5参与了TNFα诱导的SK–BR–3乳腺癌细胞凋亡过程。

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