【摘 要】
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目的 建立分子信标荧光PCR体系检测产气荚膜梭菌的快速检测方法,应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检验.方法 根据GenBank公布的保守序列,针对α毒素基因设计一对引物和分
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目的 建立分子信标荧光PCR体系检测产气荚膜梭菌的快速检测方法,应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检验.方法 根据GenBank公布的保守序列,针对α毒素基因设计一对引物和分子信标探针,用FAM荧光剂标记探针的5端,并进行特异性和灵敏度分析,同时以10种细菌作对照.结果 分子信标荧光PCR反应体系检测10种细菌,只有产气荚膜梭菌出现特异荧光信号,其他均无荧光信号,而且与其他细菌无交叉反应.对40份食品样品进行检测,3份产气荚膜梭菌PCR阳性,其余样品为阴性,检测仅需2 h.3份阳性样本经传统方法培养,2份有检出产气荚膜梭菌.结论 分子信标荧光PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于产气荚膜梭菌食物中毒的快速诊断和食品污染物及感染性腹泻等临测工作中,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.
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