β-罗勒烯信号传导途径关键基因突变体的筛选

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β-罗勒烯作为一种植物通讯信号分子可以诱导植物的整体防御反应,但是目前对β-罗勒烯信号传导途径上的关键组分并不清楚.为了找到β-罗勒烯信号传导途径关键基因的突变体,本研究采用正向遗传学的方法,以带有PDF1.2pro∷Luciferase和PR1pro∷Luciferase表达框的转基因拟南芥为背景材料(M0),选用0.2% (v/v) EMS浓度构建了诱变群体,通过荧光素酶-荧光素活体荧光成像系统检测荧光表型来筛选突变体,成功筛选出了经β-罗勒烯诱导不发荧光的PDF1.2pro∷Luciferase突变体植株(Ef) 12株和PR1pro∷Luciferase突变体植株(E1) 10株,并在M2代确定了稳定不发荧光的表型.M3代检测β-罗勒烯信号途径下游基因PDF1.2与PR1的表达,以及测序验证突变体植株PDF1.2pro∷Luciferase和PR1pro∷Luciferase表达框的完整性,最后确认获得了与β-罗勒烯信号传导途径相关的可靠突变体的Ef材料为8株,E1材料为3株,为进一步探明β-罗勒烯信号传导途径的关键组分及其机制提供依据.
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